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质粒提取与纯化 — 我们不一样

日期: 2018-11-20
浏览次数: 37

质粒提取与纯化 — 我们不一样

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质粒是细菌中独立于基因组DNA外的小型环状DNA分子,具有自主复制的能力,并能在子代细胞中维持稳定的拷贝数。质粒能够携带外源基因进入细菌中扩增或者表达,是最常用的外源基因载体,在分子克隆、重组病毒的制备、蛋白表达以及药物筛选等领域广泛应用。

质粒提取与纯化 — 我们不一样

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生命科学实验室的“圣经”《分子克隆实验指南》中关于质粒提取的经典方法有碱裂解法和煮沸法?#21462;?#20256;统的碱裂解法操作时间久,所得质粒?#25335;?#22810;且蛋白质等杂质去除彻底,但实验过程中涉及酚氯仿的使用,不利于操作者的健康;煮沸法操作简单,时间短,但所得质粒纯度和产量均?#31995;汀?#38543;着分子生物学技术的发展,出现了很多商品化的质粒提取试剂盒,其中碱裂解法的试剂盒因简便有效最受欢迎。

以碱裂解法为原理发展起来?#32435;?#19994;化试剂盒主要有离心柱法和磁珠法两种,主要区别是采用不同的吸附材料进行质粒的分离。离心柱法利用特殊硅基质膜在不同pH值和盐离子浓度下对质粒的吸附能力不同而分离出质粒;磁珠法利用超顺磁性的硅羟基磁珠在高盐条件下吸附质粒,低盐条件下洗脱释放质粒的特性,分离纯化质粒。质粒提取与纯化 — 我们不一样

离心柱法与磁珠法提取质粒优缺点对比

超顺磁性的硅羟基磁珠具有粒径小,比表面积大,磁分离速度快等特点,使得磁珠法的质粒提取试剂盒具有核酸吸附量多,分离洗涤更彻底,不需反复离?#27169;?#26082;可手工操作也可配合自动化设备等优势,这也是越来越多的科研人员和工业客户选择磁珠法质粒提取试剂盒的原因。

目前市面上已有多种磁珠法质粒提取试剂盒,但提取质量却参差不齐。影响质粒提取产量的因素有很多,主要是试剂的裂解能力及磁珠的特性(均一性、表面官能团的密?#21462;?#30913;响应速度等)?#27426;?#24433;响质粒提取纯度的主要因素是洗涤试剂去除RNA、细菌DNA片段、蛋白质等杂质的能力。

东纳生物的磁珠法质粒小提试剂盒采用批量生产和?#32454;?#36136;控的MagbeadsTM硅羟基磁珠,具有快速磁响应性、高?#26579;?#19968;性、良好分散性,配合试剂盒中独有的裂解液和洗涤液,在保证高产量的同时又能完全去除RNA、细菌DNA碎片、蛋白质等杂质的污染。

质粒提取与纯化 — 我们不一样

? ? ? ? ? ? 东纳生物MagbeadsTM硅羟基磁珠

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质粒提取与纯化 — 我们不一样

?东纳生物磁珠法质粒提取试剂盒工作原理

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采用4个批次的东纳生物磁珠法质粒小提试剂盒(货号:MBD08)与知名公司1(离心柱法)和知名公司2(磁珠法)质粒提取试剂盒进行对?#21462;?#25353;各自?#24471;?#20070;操作,对菌液OD660=1.80的大肠?#21496;?#36827;行质粒提取(质粒名称:pEGFP-N1)。取5%的产物(洗脱体积100 μL)于1%的琼脂糖凝胶电泳分析,MTakara DL15000 DNA Marker,实验结果表明东纳生物磁珠法质粒小提试剂盒质粒提取产量与知名公司1无明?#22278;?#21035;,但东纳生物无RNA污染,盐离子等杂质去除也更彻底,纯度更优。知名公司2磁珠法提取质粒的产量及纯度明显不如东纳生物磁珠法质粒小提试剂盒。且东纳生物4个批次试剂质粒提取效果无明?#22278;?#21035;,?#24471;?#19996;纳生物?#32454;?#30340;产品质控保证了多批次试剂提取效果的一致性

质粒提取与纯化 — 我们不一样

?东纳生物磁珠法质粒小提试剂盒与知名公司提取效果凝胶电泳图对比

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东纳生物磁珠法质粒小提试剂盒与知名公司提取产量与纯度对比(Nano-300检测):

质粒提取与纯化 — 我们不一样


质粒提取与纯化 — 我们不一样

东纳生物磁珠法质粒小提助力小工具磁力架

东纳生物磁珠法质粒小提助力小工具专为本公司MagbeadsTM硅羟基磁珠开发磁分离速度更快,分离更彻底。不一样的质粒小提,不一样的产量,不一样的纯度,为您的实验添油助力!

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